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多通道抗凝血藥物篩選檢測(cè)儀的研制
摘要：介紹一種以透射比濁法為設(shè)計(jì)原理，單片機(jī)89C52為核心的96通道高速抗凝血藥物篩選平臺(tái)。該儀器自動(dòng)完成血液（血漿）凝血時(shí)間的實(shí)時(shí)檢測(cè)及數(shù)據(jù)采集，數(shù)據(jù)采集的精度、速度及靈敏度較傳統(tǒng)的凝血時(shí)間測(cè)量?jī)x器有較大的提高。提出了將凝血時(shí)間測(cè)量用于相關(guān)藥物篩選的新途徑。關(guān)鍵詞：檢測(cè)儀 單片機(jī) 凝血時(shí)間 藥物篩選
血液凝固的過(guò)程非常復(fù)雜的。生物體在正常生理狀態(tài)下，血液中的凝血系統(tǒng)與抗凝血系統(tǒng)處于自我調(diào)節(jié)的一種平衡狀態(tài)，如果這種平衡被破壞，就會(huì)形成凝血系統(tǒng)疾病�，F(xiàn)在臨床上最常用的抗凝血類藥物是肝素，這種藥物雖然有很好的抗凝血效果，卻伴隨著血和血小板減少等副作用，而且當(dāng)患者本身患有彌散性血管內(nèi)凝血等疾病時(shí)便無(wú)法采用�，F(xiàn)有的口服類抗凝血藥物（如節(jié)丙酮香豆素[1]）的使用效果又不甚理想。因此，新型抗凝血藥物的研制工作是非常必要的。
進(jìn)行抗凝血藥物開(kāi)發(fā)的第一步就是要檢驗(yàn)藥物的抗凝效果，也就是凝血時(shí)間的檢測(cè)�，F(xiàn)在際上普通認(rèn)可的測(cè)量凝血時(shí)間的指標(biāo)主要有兩個(gè)：凝血酶原時(shí)間（Prothrombin Time,PT）和活化部分凝血活酶時(shí)間（Actived Partial Thromboplastin Time,APTT）。這兩個(gè)指標(biāo)是由國(guó)際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)（ICSH）、估計(jì)血檢與止血委員會(huì)（ICTH）和美國(guó)臨床檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)（NCCLS）聯(lián)合制定分布的[2]。PT和APTT不僅能取代傳統(tǒng)的Duke法出血時(shí)間和玻片法凝血時(shí)間而作為新的臨床止血功能指標(biāo)，并且能為抗凝血藥物開(kāi)發(fā)過(guò)程提供更好的監(jiān)控指標(biāo)。
正常的凝血過(guò)程時(shí)間很短，即使加入抗凝劑，也不會(huì)超過(guò)1分鐘。正常情況下，PT不會(huì)超過(guò)20秒，這給手工測(cè)量帶來(lái)了很大的困難。為了尋求方便的檢測(cè)途徑，國(guó)內(nèi)外許多企業(yè)已經(jīng)開(kāi)始研制相關(guān)的自動(dòng)化凝血時(shí)間測(cè)量?jī)x，并且已經(jīng)投放市場(chǎng)如德國(guó)TECO公司的TEChrom IV plus 4通道半自動(dòng)血栓/止血測(cè)定儀；法國(guó)BIOCHEM公司STAGO全自動(dòng)血栓/止血分析儀等。這些凝血測(cè)量?jī)x雖然可以完成一個(gè)或幾個(gè)樣品的同時(shí)檢測(cè)，但是仍然沿用臨床檢測(cè)的套路，檢測(cè)速度有限，樣品用量比較大，樣品波大都固定于儀器上，清洗不方便，同時(shí)價(jià)格也相當(dāng)昂貴，不適用于藥物開(kāi)發(fā)。
為了提高凝血測(cè)量?jī)x的性能，同時(shí)滿足高通量的藥物篩選的需求，我們利用單片機(jī)設(shè)計(jì)了一套新型的凝血時(shí)間自動(dòng)檢測(cè)儀，目的在于為新藥開(kāi)發(fā)質(zhì)量控制提供便利。這臺(tái)小型的凝血時(shí)間測(cè)量裝置（體積僅30cm×20cm×12cm）不僅能夠進(jìn)行96路并行實(shí)時(shí)檢測(cè)，而且樣品用量少（20μl），靈敏度高（0.1秒），具有很好的應(yīng)用前景。
1 測(cè)量原理
血液的凝固從物理上來(lái)講就是非溶性纖維蛋白形成的過(guò)程，而且在很短的時(shí)間內(nèi)非溶性纖維蛋白的數(shù)量會(huì)陡然增加。這樣，整個(gè)血液的透光率就會(huì)迅速降低（濁度升高），一段時(shí)間后就會(huì)漸漸變緩。通常我們所測(cè)量的凝血時(shí)間也就是指非溶性纖維蛋白形成的起始階段，即濁度變化達(dá)到三倍信澡比的時(shí)間。
透射比濁法正是利用了血液在凝血過(guò)程中濁度突然升高的原理來(lái)設(shè)計(jì)的。只要檢測(cè)器件具有足夠的靈敏度，就可以檢測(cè)出血液凝固的時(shí)間。
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