臭鼻桿菌腈水解酶基因(bxn)的克隆及其在原核生物中的表達(dá)

臭鼻桿菌腈水解酶基因(bxn)的克隆及其在原核生物中的表達(dá)

通過(guò)PCR技術(shù)從克雷伯氏臭鼻桿菌基因組DNA中克隆到編碼腈水解酶的基因(bxn),插入pET28a(+)載體的Nco I和Sac I之間,構(gòu)建了bxn基因的原核生物表達(dá)載體pET-BX.通過(guò)SDS-PAGE鑒定出重組克隆,在大腸桿菌 BL21(DE3)中表達(dá)出了一種37.7 kD的特異蛋白,其表達(dá)量占宿主菌總蛋白的18.2%.在添加終濃度為4 mmol/L的乳糖和28℃培養(yǎng)條件下,重組克隆菌可表達(dá)較高產(chǎn)量的特異酶蛋白,可將溴苯腈降解為無(wú)毒物質(zhì),并具有較高活性.

作 者： 張金文 熊春蓉 李靜雯 王旺田 孟亞雄 陳正華 ZHANG Jin-wen XIONG Chun-rong LI Jing-wen WANG Wang-tian MENG Ya-xiong CHEN Zheng-hua   作者單位： 張金文,李靜雯,王旺田,孟亞雄,ZHANG Jin-wen,LI Jing-wen,WANG Wang-tian,MENG Ya-xiong(甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院,甘肅,蘭州,730070)

熊春蓉,XIONG Chun-rong(甘肅省農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣總站,甘肅,蘭州,730020)

陳正華,CHEN Zheng-hua(甘肅省亞盛集團(tuán)博士后流動(dòng)站,北京,100101) 

刊 名： 草業(yè)學(xué)報(bào)  ISTIC PKU 英文刊名： ACTA PRATACULTURAE SINICA  年，卷(期)： 2006 15(6)  分類(lèi)號(hào)： S451.23 Q943.2  關(guān)鍵詞： 腈水解酶基因   pET28a(+)   酶活性   溫度   乳糖  

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