紅花石蒜 ISSR-PCR反應體系的建立

紅花石蒜 ISSR-PCR反應體系的建立

以紅花石蒜葉片基因組DNA為模板,分析了模板DNA、引物、dNTPs、Mg2+的濃度及Taq DNA聚合酶的用量對ISSR-PCR擴增結果的影響.建立了石蒜ISSR分析最優(yōu)化的反應體系及應用程序:即25 μL反應體系中,有20 ng模板DNA、0.5 μmol·L-1隨機引物、150 μmol·L-1 dNTPs、2.0 mmol·L-1 Mg2+、1.0 U Taq DNA聚合酶.反應程序為:94 ℃預變性5 min;然后45個循環(huán):每個循環(huán)94 ℃變性45 s,55 ℃退火60 s,72 ℃延伸2 min;循環(huán)結束后72 ℃延伸7 min.

作 者： 楊志玲 馮剛利 譚梓峰 欒啟福 王承南 YANG Zhi-ling FENG Gang-li TAN Zi-feng LUAN Qi-fu WANG Cheng-nan   作者單位： 楊志玲,譚梓峰,欒啟福,YANG Zhi-ling,TAN Zi-feng,LUAN Qi-fu(中國林業(yè)科學研究院亞熱帶林業(yè)研究所,浙江富陽,311400)

馮剛利,FENG Gang-li(中國林業(yè)科學研究院亞熱帶林業(yè)研究所,浙江富陽,311400;中南林學院資源與環(huán)境學院,湖南長沙,410004)

王承南,WANG Cheng-nan(中南林學院資源與環(huán)境學院,湖南長沙,410004) 

刊 名： 林業(yè)科學研究  ISTIC PKU 英文刊名： FOREST RESEARCH  年，卷(期)： 2006 19(4)  分類號： S567.2  關鍵詞： 紅花石蒜   葉片   ISSR-PCR  

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