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豬圓環(huán)病毒2型核酸疫苗的構建及其免疫效果
[目的]構建豬圓環(huán)病毒2型(PCV2)ORF2基因疫苗,并對其免疫效果和安全性進行研究.[方法] 將PCV2 ORF2基因從pMD-ORF2*質粒(包含PCV2 SCH A株ORF2基因)酶切回收,插入到真核表達載體pcDNA-3.1(+)中,構建真核表達質粒pcDNA-ORF2,對該質粒進行酶切和PCR鑒定.將pcDNA-ORF2轉染IBRS-2細胞,進行Western blotting檢測.將構建好的pcDNA-ORF2制成核酸疫苗,按100 μg/只腿部肌肉注射免疫Balb/c小白鼠,同時設pcDNA-3.1(+),PCV2全毒和PBS為對照,共免疫2次,間隔2周.分別于首免后第14天和56天采血,用ELISA法檢測抗體;于首免后第56天,采用淋巴細胞增殖試驗(MTT法)和流式細胞儀(FACS)對小鼠的細胞免疫進行檢測.取首免后56 d小鼠的心肝、脾、肺、腎和腦等實質器官,采用PCR方法檢測pcDNA-ORF2核酸疫苗的安全性.[結果] Western blotting結果顯示,pcDNA-ORF2構建成功,并在哺乳動物細胞中獲得表達.pcDNA-ORF2核酸疫苗能誘導小鼠產生較強的細胞免疫和體液免疫應答.PCV2 ORF2基因未整合到小鼠染色體上.[結論] pcDNA-ORF2可誘導小鼠產生免疫反應,其對小鼠是安全的.
作 者： 王新 郭萬柱 周婷 徐志文 王印 王小玉 作者單位： 王新(西北農林科技大學,食品學院,陜西,楊陵,712100)郭萬柱,徐志文,王印,王小玉(四川農業(yè)大學,動物生物技術中心,四川,雅安,625014)
周婷(西北農林科技大學,動物醫(yī)學院,陜西,楊陵,712100)
刊 名： 西北農林科技大學學報(自然科學版) ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF NORTHWEST A&F UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION) 年，卷(期)： 2008 36(8) 分類號： S852.65 關鍵詞： 豬圓環(huán)病毒2型 ORF2基因 核酸疫苗【豬圓環(huán)病毒2型核酸疫苗的構建及其免疫效果】相關文章：
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