穩(wěn)定表達(dá)hHCN2基因 HEK293細(xì)胞系的建立

穩(wěn)定表達(dá)hHCN2基因 HEK293細(xì)胞系的建立

目的:培育穩(wěn)定表達(dá)hHCN2基因的細(xì)胞系,建立一種表達(dá)研究心肌離子通道的有效模型.方法:通過脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染的方法,將重組pcDNA3-hHCN2真核表達(dá)載體導(dǎo)入人胚腎細(xì)胞(HEK293細(xì)胞),以G418壓力篩選轉(zhuǎn)染細(xì)胞,并對(duì)其進(jìn)行全細(xì)胞膜片鉗記錄.結(jié)果:經(jīng)600μg/ml壓力篩選后,獲得抗性細(xì)胞克隆,并用全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)記錄到克隆hHCN2通道編碼電流.結(jié)論:本實(shí)驗(yàn)采用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法成功地培育出G418抗性HEK293細(xì)胞,為進(jìn)一步研究克隆離子通道結(jié)構(gòu)和功能的關(guān)系奠定基礎(chǔ).

作 者： 趙欣 楊向軍 白霞 李紅霞 程緒杰 蔣文平 ZHAO Xin YANG Xiang-Jun BAI Xia LI Hong-xia CHENG Xu-jie JIANG Wen-ping   作者單位： 趙欣,楊向軍,李紅霞,程緒杰,蔣文平,ZHAO Xin,YANG Xiang-Jun,LI Hong-xia,CHENG Xu-jie,JIANG Wen-ping(蘇州大學(xué)附屬第一醫(yī)院心內(nèi)科,江蘇,蘇州,215006)

白霞,BAI Xia(江蘇血液病研究所,江蘇,蘇州,215006) 

刊 名： 中國應(yīng)用生理學(xué)雜志  ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF APPLIED PHYSIOLOGY  年，卷(期)： 2006 22(2)  分類號(hào)： Q786  關(guān)鍵詞： 細(xì)胞系   基因轉(zhuǎn)染   膜片鉗  

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