棉鈴蟲組織蛋白酶B酶原在畢赤酵母中的表達(dá)

棉鈴蟲組織蛋白酶B酶原在畢赤酵母中的表達(dá)

棉鈴蟲組織蛋白酶B(Helicoverpa armigera Cathepsin B,HCB)屬于半胱氨酸蛋白酶類,參與胚胎發(fā)育中卵黃蛋白水解供給胚胎發(fā)育的氨基酸.將HCB基因克隆到pPIC9K載體并轉(zhuǎn)化畢赤酵母KM71菌株,經(jīng)甲醇誘導(dǎo),HCB表達(dá)并分泌到培養(yǎng)上清中.表達(dá)產(chǎn)物經(jīng)SDS-PAGE測定分子量為38 kDa,與HCB基因編碼的蛋白質(zhì)分子量一致.用HCB的特異性抗體檢測表明重組表達(dá)產(chǎn)物為棉鈴蟲組織蛋白酶B,原位水解實(shí)驗(yàn)顯示重組表達(dá)的蛋白酶具有蛋白水解活性,表明在畢赤酵母中表達(dá)了有活性的棉鈴蟲組織蛋白酶B,可用于組織蛋白酶B酶原活化機(jī)理研究及開發(fā)新蛋白酶產(chǎn)品.

作 者： 董杜鵑 扈進(jìn)冬 張新昌 李子勁 王金星 趙小凡 DONG Du-juan HU Jin-dong ZHANG Xin-chang LI Zi-jin WANG Jin-xing ZHAO Xiao-fan   作者單位： 山東大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,濟(jì)南,250100  刊 名： 中國生物工程雜志  ISTIC PKU 英文刊名： CHINA BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2006 26(2)  分類號： Q786  關(guān)鍵詞： 棉鈴蟲組織蛋白酶B   畢赤酵母   重組表達(dá)  

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