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轉(zhuǎn)蘇云金桿菌毒蛋白基因玉米植株的獲得及其抗蟲(chóng)性分析
玉米( Zea mays L.)轉(zhuǎn)化成功與否與基因型密切相關(guān).在轉(zhuǎn)化過(guò)程中,除少數(shù)模式品種能夠形成再生頻率較高且易轉(zhuǎn)化的Ⅱ型愈傷組織外,大多數(shù)栽培品種往往只能夠形成再生頻率較低且不易轉(zhuǎn)化的Ⅰ型愈傷組織.因此探索Ⅰ型愈傷組織的誘導(dǎo)及其轉(zhuǎn)化條件,提高轉(zhuǎn)化效率,對(duì)直接改良玉米優(yōu)良自交系具有重要意義.應(yīng)用基因槍轉(zhuǎn)化技術(shù)將蘇云金桿菌( Bacillus thuringiensis ) cry1Ac3基因?qū)胗衩變?yōu)良自交系E28及340的Ⅰ型胚性愈傷組織中,經(jīng)過(guò)膦絲菌素(PPT)或潮霉素(HygB)篩選,獲得了再生植株.經(jīng)PCR檢測(cè)、Southern blot分析及Bt毒蛋白ELISA檢測(cè)證實(shí),外源基因已整合到玉米基因組中,并已獲得表達(dá).抗蟲(chóng)性分析結(jié)果表明,部分轉(zhuǎn)基因玉米植株對(duì)玉米螟蟲(chóng)有較強(qiáng)的抗性.還比較了PPT和HygB兩種篩選劑的篩選效果,表明PPT篩選的抗性愈傷組織的再生頻率要高于HygB篩選的再生頻率.
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