CD147 shRNA質(zhì)粒表達(dá)載體的構(gòu)建及鑒定

CD147 shRNA質(zhì)粒表達(dá)載體的構(gòu)建及鑒定

目的 構(gòu)建表達(dá)細(xì)胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子(CD147,EMMPRIN)基因序列特異性的短發(fā)夾樣RNA(short hairpin RNA,shRNA)載體.方法 根據(jù)CD147基因序列及shRNA設(shè)計(jì)原則,化學(xué)合成兩段編碼短發(fā)夾RNA寡核苷酸序列,將其定向克隆到pGenesil-1.1質(zhì)粒表達(dá)載體中,重組構(gòu)建RNAi質(zhì)粒,并對(duì)重組質(zhì)粒進(jìn)行酶切分析.結(jié)果 限制性內(nèi)切酶Eeo31I和SacI酶切顯示設(shè)計(jì)合成的shRNA編碼序列被成功插入pGenesil-1.1質(zhì)粒載體中,酶切結(jié)果證實(shí)插入片段與設(shè)計(jì)序列完全一致,成功構(gòu)建針對(duì)基因CD147的shRNA質(zhì)粒表達(dá)載體.結(jié)論 成功構(gòu)建人CD147基因重組載體,為研究CD147蛋白的生物學(xué)效應(yīng)和骨肉瘤的治療提供實(shí)驗(yàn)依據(jù).

作 者： 逯強(qiáng) 呂剛 王巖峰 薛義軍   作者單位： 逯強(qiáng)(中國醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院骨科,遼寧沈陽,110001;華北煤炭醫(yī)學(xué)院附屬骨科醫(yī)院,河北唐山,063000)

呂剛,王巖峰(中國醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院骨科,遼寧沈陽,110001)

薛義軍(中國醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院泌尿外科,遼寧沈陽,110001) 

刊 名： 解剖科學(xué)進(jìn)展  ISTIC 英文刊名： PROGRESS OF ANATOMICAL SCIENCES  年，卷(期)： 2010 16(3)  分類號(hào)： Q782 R738  關(guān)鍵詞： CD147   shRNA   質(zhì)粒   載體   RNAi  

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