用組合引物PCR法簡(jiǎn)便快速篩選陽(yáng)性正向克隆

用組合引物PCR法簡(jiǎn)便快速篩選陽(yáng)性正向克隆

PCR擴(kuò)增的小片段DNA用T載體連接.轉(zhuǎn)化受體菌后觀察不到典型的藍(lán)/白斑.用插入片段的特異性引物對(duì)菌落進(jìn)行PCR來篩選陽(yáng)性正向重組于,測(cè)序鑒定結(jié)果吻合率達(dá)100%,說明當(dāng)利用顏色特性挑選陽(yáng)性克隆成為困難時(shí),菌落PCR技術(shù)是一種簡(jiǎn)單、快速、可靠的篩選方法.

作 者： 徐意 XU Yi   作者單位： 天津生物工程職業(yè)技術(shù)學(xué)院,天津,300462  刊 名： 重慶科技學(xué)院學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版）  英文刊名： JOURNAL OF CHONGQING UNIVERSITY OF SCIENCE AND TECHNOLOGY(NATURAL SCIENCES EDITION)  年，卷(期)： 2009 11(3)  分類號(hào)： Q503  關(guān)鍵詞： 組合引物PCR法   藍(lán)/白斑篩選方法   外源DNA插入方向   T載體克隆   菌落PCR  

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