活性污泥高質(zhì)量總RNA提取的一種有效方法

活性污泥高質(zhì)量總RNA提取的一種有效方法

摘要： 提取高質(zhì)量的RNA是在基因表達(dá)水平上研究廢水生物處理過(guò)程活性污泥中微生物菌群變化及關(guān)鍵調(diào)控基因表達(dá)規(guī)律的必要條件,但由于活性污泥富含腐殖質(zhì)與RNA酶,導(dǎo)致常規(guī)提取方法難以獲得高質(zhì)量的RNA.本研究通過(guò)反復(fù)探索與試驗(yàn),得到了一種經(jīng)濟(jì)而快捷的從活性污泥中提取高質(zhì)量RNA的方法,即在PBS洗滌沉淀污泥的基礎(chǔ)上,用含PVP和巰基乙醇的CTAB(十六烷基溴化三甲胺)裂解液裂解活性污泥細(xì)胞,并與細(xì)胞中的核酸形成核酸-CTAB復(fù)合體,然后用酚-氯仿-異戊醇去除細(xì)胞裂解液中的蛋白,最后采用LiCl選擇性沉淀其中的RNA.經(jīng)核酸蛋白測(cè)定儀和1 %變性瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)表明,用此方法提取的RNA均一性和完整性好,并且具有反轉(zhuǎn)錄活性. 作 者： 黎秋華    李平    陳忠正    吳錦華    梁世中    LI Qiu-hua    LI Ping    CHEN Zhong-zheng    WU Jin-hua    LIANG Shi-zhong   作者單位： 黎秋華,梁世中,LI Qiu-hua,LIANG Shi-zhong(華南理工大學(xué)生物科學(xué)與工程學(xué)院,廣東,廣州,510006)

李平,吳錦華,LI Ping,WU Jin-hua(華南理工大學(xué)環(huán)境科學(xué)與工程學(xué)院,廣東,廣州,510006)

陳忠正,CHEN Zhong-zheng(華南農(nóng)業(yè)大學(xué)食品學(xué)院,廣東,廣州,510640) 

期 刊： 陜西科技大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版）  ISTIC   Journal： JOURNAL OF SHAANXI UNIVERSITY OF SCIENCE AND TECHNOLOGY(NATURAL SCIENCE EDITION)  年，卷(期)： 2008, 26(4)  分類號(hào)： X172  關(guān)鍵詞： 活性污泥    RNA提取    CTAB   

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