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植物總蛋白提取方法
植物總蛋白提取試劑盒
產(chǎn)品組成:
產(chǎn)品組成 規(guī)格 植物蛋白提取液 蛋白穩(wěn)定劑 蛋白酶抑制劑混合物
BB-3124-1
50T 25ml 200ul 100ul
BB-3124-2 100T 50ml 400ul 200ul
儲存條件:
蛋白提取液、穩(wěn)定劑2-8℃保存; 蛋白酶抑制劑-20℃保存。
有效期:
一年。
產(chǎn)品簡介:
本試劑盒提供配套試劑,適用于從各種植物細胞、組織樣本中提取總蛋白。提取過程簡單方便。本試劑盒提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白質電泳、免疫共沉淀等蛋白研究。本試劑盒提取的蛋白不可用于2D電泳。如下游實驗需要用于2D電泳、等電聚焦電泳,請使用貝博其他貨號的試劑盒。
使用方法:
植物組織樣本:
1、 提取液準備:每500ul冷的提取液中加入4ul蛋白穩(wěn)定劑和2ul蛋白酶抑制劑,
混勻后置冰上備用。
2、 取洗凈擦干后并去除葉梗和粗脈的200mg鮮嫩植物組織樣本剪碎,采用以下一
種方法處理:
i. 加入500ul提取液A后用勻漿機/勻漿器勻漿。 ii. 置于研缽中用液氮研磨,研磨后加入500μl冷的提取液 A。 iii. 加入500ul提取液A直接置冰上研磨。
3、 研磨后吸入一個預冷的干凈離心管中在冰上或4℃冰箱靜置1小時。 4、 在4℃,12000rpm以上條件下離心10-15分鐘。
5、 將上清吸入另一預冷的干凈離心管,即可得到總蛋白。
上述蛋白提取物請分裝后于-80℃冰箱保存?zhèn)溆没蛑苯佑糜谙掠螌嶒灐?/p>
細胞樣本:
1、 提取液準備:每500ul冷的提取液中加入4ul蛋白穩(wěn)定劑和2ul蛋白酶抑制劑,
混勻后置冰上備用。 2、 細胞用PBS洗滌2次。
3、 加入細胞體積5-10倍體積的蛋白提取液,振蕩1小時。 4、 在4℃,12000rpm以上條件下離心10-15分鐘。
5、 將上清吸入另一預冷的干凈離心管,即可得到總蛋白。
上述蛋白提取物請分裝后于-80℃冰箱保存?zhèn)溆没蛑苯佑糜谙掠螌嶒灐?/p>
凍存樣本:
1、 凍存組織樣本參照上述組織樣本步驟操作。
2、 凍存細胞樣本中直接加入5-10倍體積的蛋白提取液,振蕩30分鐘。 3、 在4℃,12000rpm以上條件下離心15分鐘。
4、 將上清吸入另一預冷的干凈離心管,即可得到總蛋白。
上述蛋白提取物請分裝后于-80℃冰箱保存?zhèn)溆没蛑苯佑糜谙掠螌嶒灐?/p>
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