植物核蛋白-細胞質(zhì)蛋白提取方法

時間：2023-05-01 06:32:52 資料我要投稿

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植物核蛋白和細胞質(zhì)蛋白提取試劑盒

植物核蛋白-細胞質(zhì)蛋白提取方法

產(chǎn)品組成：

產(chǎn)品組成規(guī)格提取液A

植物細胞核蛋白提取液B 植物胞質(zhì)蛋白提取液C 蛋白酶抑制劑混合物

說明書

BB-3169-1 50 assays 25ml 10ml 2.5ml 250ul 一份

BB-3169-2 100 assays

50ml 20ml 5ml 500ul 一份

儲存條件：

蛋白提取液2-8℃保存；蛋白酶抑制劑-20℃保存。

有效期：

一年。

產(chǎn)品簡介：

貝博植物核蛋白和細胞質(zhì)蛋白提取試劑盒提供全套試劑，適用于從各種植物細胞和各種實體植物組織，如葉片、根、種子等植物組織中提取核蛋白和其它細胞質(zhì)蛋白。提取過程簡單方便，可在1小時內(nèi)完成。制備的核蛋白不僅純度高，保持天然活性，而且絕少交叉污染。提取的蛋白可用于Western Blotting、轉(zhuǎn)錄活性分析、Gel shift凝膠阻滯實驗、免疫共沉淀、酶活性測定等蛋白研究。

使用方法：

1. 提取液制備：每500ul預(yù)冷的蛋白提取液A中加入2ul蛋白酶抑制劑；每200ul

蛋白提取液B中分別加入2ul蛋白酶抑制劑混合物，混勻后置冰上備用。 2. 取洗凈擦干后并去除葉梗和粗脈的200mg植物組織樣本剪碎，采用以下一種方

法處理：

i. 加入500ul提取液A后用勻漿機/勻漿器勻漿。

ii. 置于研缽中用液氮研磨，研磨后加入500μl冷的提取液 A。 iii. 加入500ul提取液A直接置冰上研磨。

3. 高速渦旋振蕩5秒，然后在4℃，100×g力條件下離心1分鐘。 4. 收集上清，棄沉淀。

5. 將上清在4℃，600×g力條件下離心1分鐘。 6. 收集沉淀，將上清移入另一干凈的離心管。

7. 在沉淀中加入100-200μl冷的提取液B，高速渦旋振蕩15秒。 8. 置冰上40分鐘，每隔10分鐘高速渦旋振蕩15秒。 9. 在4℃，16000×g條件下離心10分鐘。

10. 快速將上清吸入另一預(yù)冷的干凈離心管，即得到核蛋白。

11. 在步驟6中的上清中加入50ul胞質(zhì)提取液C，高速渦旋振蕩15秒，充分混勻。

12. 置冰上40分鐘，每隔10分鐘高速渦旋振蕩15秒。 13. 在4℃，16000×g條件下離心10分鐘。