不同方法對(duì)手足口病的檢查對(duì)比分析論文
摘 要:目的:探討不同方法對(duì)于手足口病的檢查效果。方法:確診手足口病患兒120例,分離一份血清,采用散射免疫比濁析法測(cè)定cTnI含量;分離一份血清進(jìn)行熒光RT-PCR分析。結(jié)果:cTnI檢測(cè)的陽(yáng)性率為81.7%,熒光RT-PCR法檢測(cè)的陽(yáng)性率為98.3%,兩者比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論:熒光RT-PCR法檢測(cè)手足口病感染病毒的陽(yáng)性率高,有利于手足口病的確診,值得在有條件的醫(yī)院推廣應(yīng)用。
關(guān)鍵詞:手足口;診斷;cTnI;熒光RT-PCR
手足口。℉FMD)是小兒的一種常見(jiàn)傳染病,可由多種腸道病毒引起,對(duì)小兒的影響極大,也容易造成死亡。同時(shí)部分病例可有中樞神經(jīng)系統(tǒng)并發(fā)癥,導(dǎo)致殘疾或死亡[1]。近年來(lái)流行病學(xué)和臨床研究發(fā)現(xiàn),手足口病能引起患兒多項(xiàng)檢驗(yàn)指標(biāo)異常[2]。文章為此具體探討了不同方法對(duì)于手足口病的檢查效果,現(xiàn)報(bào)告如下。
1 資料與方法
1.1 一般資料:選取2010年4月~2010年11月本院住院的確診手足口病患兒120例,均符合相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn),其中男55例,女65例;年齡8個(gè)月~6歲,平均(3.2±0.8)歲;體重7.5~21.0 kg,平均(14.2±2.2)kg。<3歲90例,≥3歲30例。所有患兒常規(guī)進(jìn)行體溫測(cè)量和體格檢查,抽靜脈血查血常規(guī),X線胸片檢查。
1.2 標(biāo)本采集:采集小兒血清配對(duì)血清雙份用于抗體檢測(cè)。靜脈采集3~5 ml全血,置于真空無(wú)菌采血管中,自凝后,分離血清,將血清置于-20℃以下冰箱中冷凍保存。
1.3 檢查方法:一份血清用來(lái)cTnI含量測(cè)定,采用散射比濁法分析,試劑盒由北京科美東雅生物技術(shù)有限公司提供,操作按說(shuō)明書(shū),以cTnI>0.30 ng/ml為陽(yáng)性。另一份血清進(jìn)行熒光RT-PCR分析,試劑盒由廣州達(dá)安基因生物技術(shù)有限公司提供。實(shí)時(shí)熒光定量PCR反應(yīng)在DA7600 PCR儀上進(jìn)行PCR擴(kuò)增,按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行反應(yīng)混合液的配制和循環(huán)參數(shù)的設(shè)置,同時(shí)設(shè)置陽(yáng)性梯度模板和陰性對(duì)照。結(jié)果判定嚴(yán)格按照DA7600 PCR儀器操作說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。
1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理:所有資料利用Excel 2003和SPSS 19.0軟件進(jìn)行錄入、整理和分析,主要分析指標(biāo)為陽(yáng)性率,計(jì)數(shù)資料對(duì)比采用2檢驗(yàn),以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2 結(jié)果
cTnI放射免疫法檢測(cè)的陽(yáng)性率為81.7%,熒光RT-PCR法檢測(cè)的陽(yáng)性率為98.3%,兩者比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
3 討論
手足口病是一種由EV71和CA16等多種病毒引起的兒童傳染病。有研究證實(shí),在歷次手足口病流行中,EV71與CA16交替或共同出現(xiàn),成為手足口病的主要病原體[3]。而EV71感染不僅可引起手足口病和皰疹性咽峽炎,且還可侵犯神經(jīng)系統(tǒng),主要表現(xiàn)為急性病毒性腦炎、無(wú)菌性腦膜炎等,多發(fā)生于3歲以下幼兒,1歲以下嬰兒發(fā)病率最高[4]。本組120例患兒中,只有10例年齡>5歲,且以<3歲為主,與本病的年齡特點(diǎn)相符合。同時(shí),未見(jiàn)有6個(gè)月以內(nèi)的小嬰兒受染,這可能與該年齡段的小兒較少外出以及體內(nèi)胎傳抗體未完全消耗有關(guān)。
大多數(shù)手足口病小兒癥狀輕微,以發(fā)熱和手、足、口腔等部位的皮疹或皰疹為主要臨床特征。不過(guò)手足口病并發(fā)神經(jīng)系統(tǒng)感染患兒可引發(fā)循環(huán)衰竭、肺出血進(jìn)而發(fā)展為以呼吸衰竭為主的全身多臟器功能障礙綜合征甚至多臟器衰竭而死亡[5]。
在手足口病的檢查中,cTnI是心肌細(xì)胞中的.特有蛋白質(zhì),心肌細(xì)胞受損時(shí),cTnI釋放入血,在胸痛發(fā)生4~6 h后,血中cTnI水平超過(guò)正常上限,12~24 h達(dá)到高峰,可持續(xù)14 d之久。因此,cTnI在診斷手足口病患兒心肌損傷中具有一定的優(yōu)勢(shì)[6-7]。近幾年發(fā)展起來(lái)的以特異性熒光探針為特點(diǎn)的熒光PCR技術(shù),實(shí)行完全閉管式操作,不僅能大大減少擴(kuò)增產(chǎn)物污染的機(jī)會(huì),而且較常規(guī)RT-PCR技術(shù),無(wú)論從敏感性、特異性與速度上都更具有優(yōu)勢(shì)。本文結(jié)果顯示,cTnI放射免疫法檢測(cè)的陽(yáng)性率為81.7%,熒光RT-PCR法檢測(cè)的陽(yáng)性率為98.3%,兩者比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
總之,熒光RT-PCR法檢測(cè)手足口病感染病毒的陽(yáng)性率高,有利于手足口病的確診,值得在有條件的醫(yī)院推廣應(yīng)用。
4 參考文獻(xiàn)
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