三重實時熒光RT-PCR檢測三種魚類彈狀病毒的研究

三重實時熒光RT-PCR檢測三種魚類彈狀病毒的研究

魚傳染性造血器官壞死病病毒(Infectious hematopoietic necros virus IHNV)、魚病毒性出血性敗血癥病毒(Viral hemorrhagic septicemia virus VHSV)和鯉春病毒血癥病毒(Spring viraemia of carp virus SVCV)是同屬彈狀病毒科(Rhabdoviridae)的3種魚類病毒,也是影響水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的3種重要病毒.通過對這3種病毒基因序列的分析,在病毒基因的高保守區(qū)域,設(shè)計了3條分別針對這3種病毒的TaqmanMGB探針,并選擇3種無相互干擾的熒光基團進行標記.以此為基礎(chǔ)建立針對該3種病毒的三重實時熒光RT-PCR的檢測方法.通過反應(yīng)條件的優(yōu)化,該三重實時熒光RT-PCR最低可檢測至102拷貝/反應(yīng)的病毒量.同時.該方法還對病毒混合感染EPC細胞(Epithelioma papulosum cyprini)和攻毒斑馬魚進行了檢測.實驗結(jié)果表明,該方法是一種特異、靈敏、高效的病毒檢測方法.

作 者： 許建明 段向英 張念之 蔣一男 張利峰 Xu Jianming Duan Xiangying Zhang Nianzhi Jiang Yinan Zhang Lifeng   作者單位： 許建明,Xu Jianming(中國農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)業(yè)部預(yù)防獸醫(yī)學(xué)重點實驗室,北京,100094;北京出入境檢驗檢疫局,北京)

段向英,張利峰,Duan Xiangying,Zhang Lifeng(北京出入境檢驗檢疫局,北京)

張念之,蔣一男,Zhang Nianzhi,Jiang Yinan(中國農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)業(yè)部預(yù)防獸醫(yī)學(xué)重點實驗室,北京,100094) 

刊 名： 檢驗檢疫學(xué)刊  英文刊名： INSPECTION AND QUARANTINE SCIENCE  年，卷(期)： 2009 19(1)  分類號： S941.41 Q503  關(guān)鍵詞： IHNV   VHSV   SVCV   Taqman MGB探針   三重實時熒光RT-PCR  

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