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人IGF-1在大腸桿菌中的可溶表達(dá)和純化
目的:在大腸桿菌中的可溶表達(dá)和純化人胰島素樣生長因子1(hIGF-1).方法:根據(jù)hIGF-1的氨基酸序列和大腸桿菌密碼子偏愛性,利用重疊延伸PCR的方法合成hIGF-1 DNA序列,構(gòu)建表達(dá)載體,在大腸桿菌Origami B(DE3)中與硫氧還蛋白Trx A融合表達(dá),并通過鹽析和鎳柱親合層析進(jìn)行純化.結(jié)果:SDS-PAGE分析顯示,重組融合蛋白以可溶形式存在,分子量約為28 kDa,占上清總蛋白的50%以上.經(jīng)鹽析和鎳柱親合層析進(jìn)行純化,目標(biāo)蛋白純度可達(dá)到90%左右.結(jié)論:復(fù)合干擾素在大腸桿菌中的高效可溶表達(dá).
作 者: 張守濤 梁會娟 張蕓 作者單位: 張守濤(鄭州大學(xué)生物工程系,河南鄭州,450001)梁會娟,張蕓(河南富邦藥業(yè)有限公司,河南鄭州,450001)
刊 名: 生物技術(shù) PKU 英文刊名: BIOTECHNOLOGY 年,卷(期): 2010 20(2) 分類號: Q819 Q786 關(guān)鍵詞: 人胰島素樣生長因子1 硫氧還蛋白 可溶表達(dá) 純化 Higf-1 Trx A soluble expression purification【人IGF-1在大腸桿菌中的可溶表達(dá)和純化】相關(guān)文章:
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