耐熱果膠裂解酶基因pel9A的克隆和表達

耐熱果膠裂解酶基因pel9A的克隆和表達

利用PCR技術(shù)從耐熱梭狀芽孢桿菌(Clostridium stercorarium)中擴增得到產(chǎn)耐熱果膠裂解酶的結(jié)構(gòu)基因pel9A,并將其克隆于表達載體pET28a中,最后將此重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到受體菌E.coli BL-21中進行表達.誘導條件為:37 ℃誘導5 h,IPTG濃度為0.8 mmol/L.重組菌經(jīng)IPTG誘導和SDS-PAGE分析表達的蛋白質(zhì)的相對分子質(zhì)量為130 000,與預期相對分子質(zhì)量相符.細胞經(jīng)超聲破碎后,測得果膠酶的比酶活為15 U/mg粗蛋白.

作 者： 甄東曉 王樹英 嚴群 李華鐘 ZHEN Dong-xiao WANG Shu-ying YAN Qun LI Hua-zhong   作者單位： 甄東曉,嚴群,ZHEN Dong-xiao,YAN Qun(江南大學,工業(yè)生物技術(shù)教育部重點實驗室,江蘇,無錫,214036)

王樹英,WANG Shu-ying(江南大學,分析測試中心,江蘇,無錫,214036)

李華鐘,LI Hua-zhong(江南大學,工業(yè)生物技術(shù)教育部重點實驗室,江蘇,無錫,214036;江南大學,醫(yī)學系,江蘇,無錫,214036) 

刊 名： 食品與生物技術(shù)學報  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF FOOD SCIENCE AND BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2006 25(3)  分類號： Q557  關(guān)鍵詞： 果膠裂解酶   耐熱梭狀芽孢桿菌   重組質(zhì)粒   大腸桿菌BL-21   表達  

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