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家蠅防御素defensin cDNA的克隆及在畢赤酵母中的表達
提取家蠅總RNA,RT-PCR擴增編碼家蠅防御素defensin的cDNA,克隆并測定了其序列,將該cDNA序列與酵母表達載體pPICZαA重組,構建酵母分泌型表達載體pPICZα-de,電激法轉(zhuǎn)化畢赤酵母(Pichia pastoris)受體菌GS115.經(jīng)表型篩選和PCR鑒定證明目的片段已穩(wěn)定整合到酵母染色體基因組中.在含不同濃度的Zeocin平板上篩選到高拷貝整合的轉(zhuǎn)化子,陽性克隆經(jīng)甲醇誘導表達,用Tricine-SDS-PAGE確定了表達產(chǎn)物的正確性,瓊脂孔穴平板擴散法、比濁法測定了表達產(chǎn)物的活性,對金黃色葡萄球菌Staphylococcus aureus具有一定的殺菌活性.
作 者： 金豐良 許小霞 趙士煒 古德祥 張文慶 JIN Feng-liang XU Xiao-xia ZHAO Shi-wei GU De-xiang ZHANG Wen-qing 作者單位： 中山大學有害生物控制與資源利用國家重點實驗室,廣東,廣州,510275 刊 名： 中山大學學報（自然科學版） ISTIC PKU 英文刊名： ACTA SCIENTIARUM NATURALIUM UNIVERSITATIS SUNYATSENI 年，卷(期)： 2006 45(3) 分類號： Q78 關鍵詞： 家蠅 防御素 畢赤酵母 誘導表達 活性測定【家蠅防御素defensin cDNA的克隆及在畢赤酵母中的表達】相關文章：
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