白蛋白融合α-2b干擾素在畢赤酵母中的表達(dá)

白蛋白融合α-2b干擾素在畢赤酵母中的表達(dá)

α-2b干擾素的重組表達(dá)質(zhì)粒pPIC9K-HSA-IFNα-2b經(jīng)限制性內(nèi)切酶SalI酶切線性化后電轉(zhuǎn)化巴斯德畢赤酵母菌(P.Pastoris)SMD1168,將陽性轉(zhuǎn)化子進(jìn)行PCR鑒定和Mut表型鑒定并用甲醇誘導(dǎo)表達(dá),Western-Blot結(jié)果表明白蛋白融合IFNα蛋白與IFNα抗體具有結(jié)合能力,Wish細(xì)胞-VSV病毒系統(tǒng)鑒定表達(dá)蛋白具有抗病毒生物活性.在搖瓶培養(yǎng)條件下,甲醇在0.5%～4.0%的范圍,隨著濃度的升高蛋白表達(dá)量也升高,在其他因素固定時(shí),菌體起始OD值在5～80的范圍內(nèi),隨著OD值的升高表達(dá)量反而下降.成功表達(dá)出具有高生物學(xué)活性的白蛋白融合干擾素蛋白(HSA-IFNα-2b),為進(jìn)一步應(yīng)用打下基礎(chǔ).

作 者： 張伍魁 范清林 鄒文藝 仲皙 宋禮華 ZHANG Wu-kui FAN Qing-lin ZOU Wen-yi ZHONG Xi SONG Li-hua   作者單位： 張伍魁,ZHANG Wu-kui(安徽醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院,合肥,230032)

范清林,鄒文藝,FAN Qing-lin,ZOU Wen-yi(安徽安科生物工程股份有限公司,合肥,230088)

仲皙,ZHONG Xi(中國藥科大學(xué),南京,210009)

宋禮華,SONG Li-hua(安徽醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院,合肥,230032;安徽安科生物工程股份有限公司,合肥,230088) 

刊 名： 中國生物工程雜志  ISTIC PKU 英文刊名： CHINA BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2005 25(12)  分類號： Q81  關(guān)鍵詞： 白蛋白融合α-2b干擾素   巴斯德畢赤酵母菌   Wish細(xì)胞-VSV病毒系統(tǒng)  

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