利用小干擾RNA表達(dá)框鑒定小鼠骨髓樹突狀細(xì)胞有效沉默RelB基因的實(shí)驗(yàn)研

利用小干擾RNA表達(dá)框鑒定小鼠骨髓樹突狀細(xì)胞有效沉默RelB基因的實(shí)驗(yàn)研究

目的構(gòu)建靶向小鼠RelB基因的小干擾RNA(siRNA)表達(dá)框,鑒定針對(duì)小鼠骨髓樹突狀細(xì)胞(DC)的RelB基因最有效的siRNA序列.方法利用PCR方法構(gòu)建3個(gè)不同位點(diǎn)的表達(dá)框,R1/siRNA、R2/siRNA和R3/siRNA分別位于1027、302和1121位點(diǎn).利用陽(yáng)離子脂質(zhì)體AdvantGene轉(zhuǎn)染小鼠骨髓DC,轉(zhuǎn)染24h后,脂多糖(LPS)刺激DC,用RT-PCR和免疫熒光方法檢測(cè)DC RelB基因表達(dá)的變化.結(jié)果經(jīng)LPS刺激后DC成熟,RelB基因表達(dá)顯著高于未成熟DC;R1/siRNA和R3/siRNA轉(zhuǎn)染DC后,LPS刺激仍然可以增強(qiáng)RelB基因表達(dá),而R2/siRNA轉(zhuǎn)染DC后,LPS刺激不能增加RelB基因表達(dá).結(jié)論R2/siRNA可有效抑制RelB基因表達(dá),有望用于構(gòu)建新的耐受性DC應(yīng)用于臨床免疫耐受的誘導(dǎo).

作 者： 鄭磊 包杰 王前 楊紅玲 裘宇容 ZHENG Lei BAO Jie WANG Qian YANG Hong-ling QIU Yu-rong   作者單位： 南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院檢驗(yàn)科,廣東,廣州,510515  刊 名： 南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY  年，卷(期)： 2006 26(3)  分類號(hào)： Q78  關(guān)鍵詞： siRNA   樹突狀細(xì)胞   RelB   免疫耐受  

【利用小干擾RNA表達(dá)框鑒定小鼠骨髓樹突狀細(xì)胞有效沉默RelB基因的實(shí)驗(yàn)研】相關(guān)文章：

RNA干擾技術(shù)用于survivin基因表達(dá)的研究04-27

RNA干擾對(duì)離體大鼠神經(jīng)干細(xì)胞NgR基因表達(dá)的影響04-28

Spl基因RNA干擾載體的構(gòu)建及鑒定04-26

利用siRNA干擾MGMT基因表達(dá)的初步研究04-26

大鼠CD40基因RNA干擾真核表達(dá)載體的構(gòu)建及鑒定04-26

慢病毒載體介導(dǎo)的RNA干擾抑SUPC12細(xì)胞MyD88基因的表達(dá)04-27

腺病毒載體介導(dǎo)的GFP基因在鴨胚成纖維細(xì)胞中的表達(dá)及RNA干擾04-27

小干擾RNA的合理設(shè)計(jì)04-26

靶向Nrf2基因RNA干擾真核表達(dá)載體的構(gòu)建04-29

哺乳動(dòng)物細(xì)胞小干擾RNA庫(kù)的建立和應(yīng)用04-29