利用siRNA干擾MGMT基因表達的初步研究

利用siRNA干擾MGMT基因表達的初步研究

目的采用RNA干擾(RNA interference, RNAi)技術(shù),通過構(gòu)建人O6-甲基鳥嘌呤-DNA甲基轉(zhuǎn)移酶(O6-methylguanine-DNA methyltransferase gene, MGMT)基因的特異性siRNA(small interfere RNA)真核表達載體,體外觀察對人MGMT(hMGMT)基因的沉默作用.方法將合成的發(fā)卡樣特異性hMGMT RNA干擾寡核苷酸序列插入真核表達載體并轉(zhuǎn)染體外HelaS3細胞株,以半定量RT-PCR法檢測hMGMT mRNA的表達水平,以MTT法檢測轉(zhuǎn)染后HelaS3細胞對BCNU的敏感性變化.結(jié)果成功構(gòu)建MGMT siRNA的真核表達載體;所構(gòu)建的載體能夠特異性降低hMGMT mRNA的表達水平,轉(zhuǎn)染后HelaS3細胞對BCNU的敏感性增加.結(jié)論該RNA干擾真核表達載體可以特異性干擾hMGMT基因的表達.

作 者： 王芳 周紫垣 劉勝學 曹佳 WANG Fang ZHOU Zi-yuan LIU Sheng-xue CAO Jia   作者單位： 第三軍醫(yī)大學軍事預防醫(yī)學院軍事毒理學教研室,重慶,400038  刊 名： 第三軍醫(yī)大學學報  ISTIC PKU 英文刊名： ACTA ACADEMIAE MEDICINAE MILITARIS TERTIAE  年，卷(期)： 2006 28(11)  分類號： Q503 Q782 Q786  關(guān)鍵詞： O6-甲基鳥嘌呤-DNA甲基轉(zhuǎn)移酶基因   RNA干擾   HelaS3  

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