野生型金黃色葡萄球菌腸毒素C2在E. Coli中的表達(dá)和純化研究

野生型金黃色葡萄球菌腸毒素C2在E. Coli中的表達(dá)和純化研究

目的 克隆金黃色葡萄球菌腸毒素C2(SEC2)基因在E.coli重組表達(dá),純化重組SEC2(rSEC2)并進(jìn)行生物學(xué)活性分析.方法 PCR獲得正確編碼SEC2的基因片斷,構(gòu)建表達(dá)質(zhì)粒pET -28a-sec2在E.coli BL21中表達(dá).利用離子交換和分子篩色譜純化rSEC2,四甲基偶氮唑鹽(MTT)法對(duì)rSEC2和天然SEC2(nSEC2)生物學(xué)活性進(jìn)行分析和比較.結(jié)果 可溶性rSEC2占菌體總蛋白質(zhì)的40%,兩步純化后蛋白質(zhì)純度約達(dá)9 5%,rSEC2和nSEC2均具有顯著的超抗原活性.結(jié)論 成功獲得與nSEC2有著類似活性的高純度rSEC2,為進(jìn)一步研究該蛋白質(zhì)的抗腫瘤機(jī)理奠定物質(zhì)基礎(chǔ).

作 者： 馬鳳森 應(yīng)躍斌 陳樞青 MA Feng-sen YING Yue-bin CHEN Shu-qing   作者單位： 馬鳳森,MA Feng-sen(杭州國光藥業(yè)有限公司,浙江,杭州,310018)

應(yīng)躍斌,陳樞青,YING Yue-bin,CHEN Shu-qing(浙江大學(xué),藥學(xué)院,生物制藥研究室,浙江,杭州,310031) 

刊 名： 中國生化藥物雜志  ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMICAL PHARMACEUTICS  年，卷(期)： 2006 27(5)  分類號(hào)： Q786  關(guān)鍵詞： 腸毒素   超抗原   克隆表達(dá)   陰離子交換色譜   分子篩色譜   四甲基偶氮唑鹽法   生物學(xué)活性  

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