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曼地亞紅豆杉細(xì)胞系的建立與評(píng)價(jià)
紅豆杉(Taxus)細(xì)胞內(nèi)紫杉醇的含量低且不穩(wěn)定,限制了利用細(xì)胞培養(yǎng)大規(guī)模生產(chǎn)紫杉醇的產(chǎn)業(yè)化進(jìn)程.以紫杉醇含量較高的曼地亞紅豆杉(Taxus media)為試材,誘導(dǎo)得到了曼地亞紅豆杉愈傷組織,在添加抗壞血酸(VC)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、活性炭(activated carbon)的改良B5培養(yǎng)基上,15次反復(fù)繼代培養(yǎng)后獲得了高產(chǎn)紫杉醇的細(xì)胞系.對(duì)新建立的曼地亞紅豆杉細(xì)胞系(MC)與同期誘導(dǎo)的東北紅豆杉細(xì)胞系(NC)及實(shí)驗(yàn)室繼代多年的中國(guó)紅豆杉細(xì)胞系(SC)在細(xì)胞生長(zhǎng)周期、紫杉醇含量和細(xì)胞死亡率等方面進(jìn)行了分析比較.結(jié)果表明,SC的生長(zhǎng)量達(dá)5.9倍,高于MC和NC的3.6和4.2倍.在初始接種量相近的情況下,MC的懸浮培養(yǎng)細(xì)胞在一個(gè)周期內(nèi)紫杉醇產(chǎn)量可達(dá)9.5 mg/L, 經(jīng)過(guò)茉莉酸甲酯(MJ)誘導(dǎo)后可達(dá)到41 mg/L.
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