Survivin靶向的短發(fā)夾RNA表達(dá)載體的構(gòu)建

Survivin靶向的短發(fā)夾RNA表達(dá)載體的構(gòu)建

目的:構(gòu)建存活素(Survivin)基因短發(fā)夾RNA (short hairpin RNA,shRNA)重組質(zhì)粒并測序鑒定,為下一步探索乳腺癌基因治療的RNA干擾途徑建立基礎(chǔ).方法:設(shè)計并合成有小發(fā)夾結(jié)構(gòu)的8條DNA片段,退火成互補(bǔ)雙鏈后克隆至pSilencer adeno 1.0-CMV載體中構(gòu)建重組質(zhì)粒,轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α菌株,提取質(zhì)粒行酶切鑒定后測序分析.結(jié)果:酶切鑒定和測序結(jié)果證實構(gòu)建成功.結(jié)論:survivin shRNA重組質(zhì)粒的成功構(gòu)建為下一步用腺病毒包裝,并感染荷瘤裸鼠行靶向RNA干擾抗乳腺癌的研究打下基礎(chǔ).

作 者： 謝富華 王潤秀 曹淑萍 吳小云 范啟蘭 梁念慈 XIE Fu-hua WANG Run-xiu CHAO Shu-ping WU Xiao-yun FAN Qi-lan LIANG Nian-ci   作者單位： 謝富華,XIE Fu-hua(贛南醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)與分子生物學(xué)教研室,江西,贛州,341000;廣東醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)與分子生物學(xué)研究所,廣東,湛江,524023)

王潤秀,WANG Run-xiu(贛南醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院腎內(nèi)科,江西,贛州,341000)

曹淑萍,CHAO Shu-ping(江西省峽江縣人民醫(yī)院兒科,江西,峽江,331400)

吳小云,范啟蘭,WU Xiao-yun,FAN Qi-lan(贛南醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)與分子生物學(xué)教研室,江西,贛州,341000)

梁念慈,LIANG Nian-ci(廣東醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)與分子生物學(xué)研究所,廣東,湛江,524023) 

刊 名： 贛南醫(yī)學(xué)院學(xué)報  英文刊名： JOURNAL OF GANNAN MEDICAL COLLEGE  年，卷(期)： 2009 29(2)  分類號： Q518.4  關(guān)鍵詞： survivin   RNA干擾   shRNA   質(zhì)粒構(gòu)建  

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