靶向EGFR基因的siRNA表達(dá)載體構(gòu)建及其生物學(xué)效應(yīng)的研究

靶向EGFR基因的siRNA表達(dá)載體構(gòu)建及其生物學(xué)效應(yīng)的研究

目的構(gòu)建靶向表皮生長因子受體(EGFR)基因的小干擾RNA(siRNA)表達(dá)載體(pSi-EGFR),并觀察其抑制人肺腺癌細(xì)胞株A549中EGFR基因表達(dá)的效果及生物學(xué)效應(yīng).方法利用Lipofectamine2000將構(gòu)建的pSi-EGFR載體轉(zhuǎn)入A549細(xì)胞中,應(yīng)用實(shí)時(shí)定量熒光PCR、免疫熒光和流式細(xì)胞儀檢測EGFR基因mRNA和蛋白水平的表達(dá),并采用四甲基偶氮唑藍(lán)顯色法(MTF)、集落形成實(shí)驗(yàn)觀察細(xì)胞生長變化.結(jié)果pSi-EGFR可顯著抑制A549細(xì)胞中EGFR基因的表達(dá);轉(zhuǎn)染pSi-EGFR細(xì)胞生長抑制率為67.8%,集落形成抑制率為59.4%.結(jié)論pSi-EGFR載體能夠在A549細(xì)胞中引發(fā)RNA干擾(RNAi)效應(yīng)下調(diào)EGFR基因表達(dá)來抑制細(xì)胞增殖.

作 者： 白莉 祝蓉 陳智鴻 白春學(xué) 高磊 張新 BAI Li ZHU Rong CHEN Zhi-hong BAI Chun-xue GAO Lei ZHANG Xin   作者單位： 復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院呼吸內(nèi)科,上海,200032  刊 名： 第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)  ISTIC PKU 英文刊名： ACTA ACADEMIAE MEDICINAE MILITARIS TERTIAE  年，卷(期)： 2005 27(23)  分類號： Q782 Q786 R73-362  關(guān)鍵詞： 表皮生長因子受體   RNA干擾   肺腺癌   細(xì)胞   生長  

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