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Sema4C及其相互作用蛋白GIPC的亞細胞定位及熒光共定位研究
目的:觀察腦信號蛋白Sema4C及其相互作用蛋白GIPC的亞細胞定位及兩者的熒光共定位情況,為明確Sema4C和GIPC在亞細胞水平的相互作用提供佐證.方法:將Sema4C的基因編碼區(qū)全長、胞外段和胞內(nèi)段分別構(gòu)建到pEGFPN1和pEGFPC1表達載體中,將GIPC編碼區(qū)基因構(gòu)建到pDsRed-C1表達載體中,分別轉(zhuǎn)染HEK293細胞,觀察亞細胞定位;將pEGFPN1-Sema4C和pDsRed-GIPC分別共轉(zhuǎn)染HEK293和COS7細胞,觀察兩者的熒光共定位情況.結(jié)果:酶切鑒定及測序結(jié)果表明重組載體構(gòu)建正確,Sema4C蛋白全長和胞外段呈跨膜分布,而胞內(nèi)段在全細胞中呈彌散樣分布;GIPC在胞漿內(nèi)呈斑塊狀聚集分布;pEGFPN1-Sema4C和pDsRed-GIPC存在熒光共定位區(qū)域.結(jié)論:Sema4C主要在胞膜和胞漿內(nèi)表達.GIPC主要在胞漿內(nèi)呈斑塊樣聚集分布;Sema4C和GIPC之間存在熒光共定位.
作 者: 吳燕 吳海濤 劉淑紅 范文紅 范明 WU Yan WU Hai-Tao LIU Shu-Hong FAN Wen-Hong FAN Ming 作者單位: 軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院,基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所,北京,100850 刊 名: 生物技術(shù)通訊 ISTIC 英文刊名: LETTERS IN BIOTECHNOLOGY 年,卷(期): 2008 19(3) 分類號: Q25 關(guān)鍵詞: Sema4C 腦信號蛋白 GIPC HEK293細胞 COS7細胞 激光共聚焦顯微鏡【Sema4C及其相互作用蛋白GIPC的亞細胞定位及熒光共定位研究】相關(guān)文章:
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