HBx基因缺失型突變體QSG7701細(xì)胞轉(zhuǎn)染模型的建立與鑒定

HBx基因缺失型突變體QSG7701細(xì)胞轉(zhuǎn)染模型的建立與鑒定

目的 建立穩(wěn)定表達(dá)乙型肝炎病毒X基因缺失型突變體HBx-d382和HBx-d431蛋白QSG7701肝細(xì)胞株.方法 HBxd382和HBx-d431基因經(jīng)PCR和雙酶切后,插入到真核表達(dá)載體pcDNA3中,構(gòu)成重組質(zhì)粒peDNA3/HBx-d382和pcDNA3/HBx-d431.應(yīng)用基因轉(zhuǎn)染的方法,將重組質(zhì)粒分別轉(zhuǎn)染到QSG7701肝細(xì)胞中,經(jīng)G418篩選和RT-PCR、蛋白印跡鑒定,篩選出穩(wěn)定表達(dá)HBx蛋白的細(xì)胞株.結(jié)果 經(jīng)PCR、酶切及序列鑒定,重組質(zhì)粒pcDNA3/HBx-d382和pcDNA3/HBx-d431構(gòu)建成功.RT-PCR和Western blot結(jié)果濕示,該重組質(zhì)粒能在QSG7701肝細(xì)胞中表達(dá)插入的HBx-d382和HBx-d431基因編碼的融合蛋白.結(jié)論 成功建立了穩(wěn)定表達(dá)羧基端截短的HBx蛋白肝細(xì)胞株HBx-d382和HBx-d431.HBx-d382和HBx-d431肝細(xì)胞模型的建立,為HBx-d382和HBx-d431基因及其蛋白的深入研究奠定了基礎(chǔ).

作 者： 朱平安 譚德明 陳莉 彭忠田 宋琳 ZHU Ping'an TAN Deming CHEN Li PENG Zhongtian SONG Lin   作者單位： 朱平安,ZHU Ping'an(深圳市第七人民醫(yī)院檢驗(yàn)科,廣東,深圳,518081;中南大學(xué)湘雅醫(yī)院傳染科)

譚德明,陳莉,彭忠田,宋琳,TAN Deming,CHEN Li,PENG Zhongtian,SONG Lin(中南大學(xué)湘雅醫(yī)院傳染科) 

刊 名： 胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志  ISTIC 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF GASTROENTEROLOGY AND HEPATOLOGY  年，卷(期)： 2008 17(4)  分類號： Q343.1+3  關(guān)鍵詞： 乙型肝炎病毒x基因   缺失型突變體   QSG7701細(xì)胞  

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