常用生理鹽水的配制
常用生理鹽溶液的配制
常用生理鹽溶液的配制 :
進(jìn)行在體或離體器官及組織實(shí)驗(yàn)時(shí),應(yīng)盡可能使標(biāo)本處于近似在體內(nèi)的環(huán)境以保證其正常的生命及其功能活動。其需要具備以下條件:(1)滲透壓與組織液相同;(2)有維持組織器官正常機(jī)能所必需的比例適宜的各種離子;(3)酸堿度與血漿相同并具有緩沖能力;(4)營養(yǎng)物質(zhì)、氧及溫度與組織液相同。這類液體稱為生理鹽溶液。
一、常用生理鹽溶液的配制
動物種類不同其代替液的組成各異,滲透壓也不一樣,因此,作為代替液的生理鹽溶液在組成成分上也有所區(qū)別。如:兩棲類動物體液的滲透壓相當(dāng)于0.65%NaCI溶液;溫血動物體液的滲透壓則相當(dāng)于0.9%NaCI溶液;海生動物體液的滲透壓約相當(dāng)于3%NaCI溶液。
不同動物的組織器官對氧和營養(yǎng)物質(zhì)等內(nèi)環(huán)境成分的需求有一定差異。兩棲類動物組織器官對氧和營養(yǎng)物質(zhì)需要程度低于溫血動物。各種實(shí)驗(yàn)的目的不同生理鹽溶液的組成成分可作種種變動。常用的有:生理鹽水、任氏液、樂氏液、臺氏液等。
(一) 常用生理鹽溶液及其成分
(二)利用原液配制生理鹽溶液
二、常用生理鹽溶液的用途
一般實(shí)驗(yàn)中常用的鹽溶液有生理鹽水即與血清等滲氯化鈉溶液,在冷血動物應(yīng)用0.6%~0.65%,哺乳動物應(yīng)用0.85%~0.9%。任氏液(Ringer)主要用于蛙心灌注及其他冷血動物實(shí)驗(yàn);樂氏液(Locke)用于哺乳類動物心臟、子宮及其離體臟器實(shí)驗(yàn),灌注時(shí)須于用前通入氧氣15min。低鈣樂氏液(含無水CaCl20.05g)用于離體小腸及豚鼠的離體支氣管灌注。臺氏液(Tyrode)用于哺乳動物離體小腸實(shí)驗(yàn)。
近年來對組織提取和細(xì)胞培養(yǎng)常需用胰蛋白酶(trypsin)或EDTA(ethylene diamine tetraacetic acid, Versene)對組織或細(xì)胞進(jìn)行處理。Ca2+或Mg2+對
此有妨礙作用,故在此情況,常用不含Ca2+及Mg2+的生理鹽溶液。用胰蛋白酶處理的.組織或細(xì)胞,常用溶液作為營養(yǎng)液。Moscona溶液成分為:
NaCl
KCl
8.00 g 0.20 g 0.005 g NaH2PO4 NaHCO3 Glucose 1.00 g 2.00 g
加蒸餾水到 1000 ml
需用處理的組織或細(xì)胞,所用營養(yǎng)的成分則為:
Na-Versenate
NaCl
KCl 0.2 g 8.0 g 0.2 g
1.15 g Na2HPO4
KH2PO4
Glucose 0.2 g 0.2 g
加蒸餾水到 1000 ml
三、生理鹽溶液配制注意事項(xiàng)
配制生理鹽溶液時(shí)要注意各種離子的相互作用。一般應(yīng)在實(shí)驗(yàn)前配制,并不宜放置過久,以免發(fā)生污染或某些成分發(fā)生化學(xué)變化而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,或者先將溶液的各種成分分別配制成一定濃度的基礎(chǔ)溶液備用,用時(shí)按比例取基礎(chǔ)液配制。在配制各種生理鹽溶液時(shí)應(yīng)注意以下幾點(diǎn):
1. 因生理鹽溶液中的磷酸根和碳酸根負(fù)離子常用生理鹽水的配制易與鈣離子發(fā)生反應(yīng),生成不溶性的白色磷酸鈣或碳酸鈣沉淀。所以,在配制生理鹽溶液時(shí),先將其他離子原液混合并加入蒸餾水,最后再將溶解的氯化鈣溶液一邊攪拌一邊緩緩加入,以防鈣鹽沉淀生成。
2. 葡萄糖應(yīng)在臨用時(shí)加入,加入葡萄糖的生理鹽溶液不能久置,以免發(fā)生細(xì)菌污染出現(xiàn)混濁。
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