抗凍蛋白-GUS基因誘導(dǎo)性融合表達(dá)載體轉(zhuǎn)化煙草植株中GUS活性測(cè)定

時(shí)間:2023-04-30 05:39:32 生物醫(yī)學(xué)論文 我要投稿
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抗凍蛋白-GUS基因誘導(dǎo)性融合表達(dá)載體轉(zhuǎn)化煙草植株中GUS活性測(cè)定

把修飾合成的帶有甘薯信號(hào)肽序列的抗凍蛋白成串基因與β-葡萄糖醛酸苷酶(GUS)報(bào)道基因融合克隆在大豆熱休克啟動(dòng)區(qū)下游構(gòu)建了溫度誘導(dǎo)型雙元載體pBF04, 三親株配對(duì)法轉(zhuǎn)化根癌農(nóng)桿菌,葉盤(pán)法導(dǎo)入煙草,獲得了轉(zhuǎn)基因煙草植株.將10株轉(zhuǎn)基因煙草放置在40℃誘導(dǎo)不同時(shí)間,利用熒光光度分析法測(cè)定水解液中GUS活性,結(jié)果誘導(dǎo)18、24、48小時(shí)的4株中GUS 活性明顯高于對(duì)照組和誘導(dǎo)6、12小時(shí)組,說(shuō)明我們修飾合成的抗凍蛋白與GUS基因融合構(gòu)建的載體在熱休克啟動(dòng)區(qū)控制下可以誘導(dǎo)表達(dá). 經(jīng)組織化學(xué)法測(cè)定這些陽(yáng)性植株的葉片和莖段切片細(xì)胞間隙顯示GUS活性, 提示甘薯信號(hào)肽可能起作用.

作 者: 王文艷 達(dá)來(lái) WANG Wen-yan Erden-Dalai Wu   作者單位: 內(nèi)蒙古大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,呼和浩特,010021  刊 名: 內(nèi)蒙古大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)  ISTIC PKU 英文刊名: ACTA SCIENTIARUM NATURALIUM UNIVERSITATIS NEIMONGOL  年,卷(期): 2006 37(4)  分類(lèi)號(hào): Q78  關(guān)鍵詞: 抗凍蛋白   轉(zhuǎn)基因煙草   誘導(dǎo)表達(dá)  

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