重組SARS-CoV S1蛋白抗原表位分析及抗原性檢測

時間：2023-04-27 04:30:52 生物醫(yī)學論文我要投稿

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目的對嚴重急性呼吸系統(tǒng)綜合征冠狀病毒(SARS-CoV)刺突蛋白(Spike, S)S1段進行原核重組表達,并檢測表達產(chǎn)物的抗原性.方法對S1中的HLA抗原表位進行預測分析,根據(jù)分析結(jié)果選定用于重組表達的區(qū)段,利用pET21b載體進行原核表達,將產(chǎn)物純化后利用SARS抗血清進行抗原性檢測.結(jié)果抗原表位分析表明,S1中包含有多個能夠被HLA分子有效提呈的抗原表位,綜合考慮表位肽的分布、重組表達的效率、重組蛋白的空間構(gòu)象以及引物設計的優(yōu)化等因素,選取S1中的關鍵區(qū)域259～565 aa進行原核重組表達,得到了包涵體形式的重組蛋白,經(jīng)過純化和復性,獲得了純度較高的可溶性S1蛋白;用SARS抗血清對此重組蛋白進行免疫學鑒定,表明該蛋白具有SARS特異的抗原性.結(jié)論重組表達的S1蛋白具有較強的抗原性,為進一步的疫苗研究和抗體篩選奠定了基礎.

作者：邵紅偉藍東明陳尚武劉澤寰黃樹林 SHAO Hong-wei LAN Dong-ming CHEN Shang-wu LIU Ze-huan HUANG Shu-lin 作者單位：邵紅偉,黃樹林,SHAO Hong-wei,HUANG Shu-lin(廣東藥學院,生命科學與生物制藥學院/生物制藥研究所,廣東,廣州,510006)

藍東明,陳尚武,LAN Dong-ming,CHEN Shang-wu(中山大學,生命科學學院,廣東,廣州,510275)

劉澤寰,LIU Ze-huan(暨南大學,生命與健康工程研究院,廣東,廣州,510632)

刊名：廣東藥學院學報 ISTIC 英文刊名： JOURNAL OF GUANGDONG COLLEGE OF PHARMACY 年，卷(期)： 2008 24(3) 分類號： Q786 關鍵詞： SARS S1蛋白抗原表位重組表達

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