尋常型銀屑病并發(fā)尋常性天皰瘡2例
銀屑病中細胞凋亡相關基因bcl-2、Fas、bax的檢測
摘要 為了探討細胞凋亡相關基因bcl-2、Fas、bax在銀屑病發(fā)病中的意義，采用免疫組化ABC法、SABC法檢測了這幾種基因在15例銀屑病組織中的表達。結果發(fā)現(xiàn)銀屑病的角質形成細胞中抑凋亡基因bcl-2幾乎不表達，促凋亡基因Fas、bax陽性表達。提示促凋亡基因Fas、bax在銀屑病中發(fā)病起重要作用，而抑凋亡基因bcl-2作用可能不大。
關鍵詞 銀屑病、 bcl-2基因、 Fas基因、 bax基因。
銀屑病的發(fā)病機理尚不明確，角質形成細胞異常增生和角化不全是銀屑病的主要病理改變，以往對這方面的研究主要集中在免疫學和生化學方面。近年來銀屑病與細胞凋亡的關系逐漸受到越來越多學者的重視。國外有學者報道銀屑病表皮中角質形成細胞凋亡異常增多。抑凋亡基因bcl-2和促凋亡基因Fas、bax是現(xiàn)今研究較多、較重要的幾個細胞凋亡相關基因。為了探討這幾種基因在銀屑病發(fā)病中的意義，我們采用免疫組化方法檢測了銀屑病中細胞凋亡相關基因bcl-2、Fas及bax。
1 材料和方法
1．1標本來源：采用1994-1997年我院保存的石蠟包埋組織塊。尋常型銀屑病15例，其中男8例，女例；年齡11-68歲，平均年齡 29.13歲；均為進行期銀屑病。6名正常人皮膚組織，皆取自皮膚外科行重瞼術、面部美容切除術者的皮膚，石蠟包埋作為對照組。測定前先將石蠟包埋組織塊作常規(guī)組織切片及HE染色，在光鏡下核對診斷，證實其病理診斷無誤方采用。
1．2試劑：鼠抗人bcl-2單克隆抗體購自Dako公司，生物素化羊抗鼠單克隆抗體系華美生物制品公司產(chǎn)品。兔抗人Fas多抗、兔抗人bax多抗及鏈酶親和素-生物素-過氧化酶復合物免疫組化試劑盒（簡稱SABC試劑盒）均購自武漢博士德生物工程公司。
1．3方法：載玻片用APES處理后干燥備用，切取4-5μm厚的石蠟切片，常規(guī)脫蠟水化。Bcl-2基因的檢測參照ABC法稍加改進，陽性對照為正常淋巴結，陰性對照為不加一抗。Fas、bax基因的檢測采用SABC法，陽性對照分別為武漢博士德生物工程公司提供的Fas、bax基因陽性對照片，陰性對照為不加一抗。
1．4判斷：顯微鏡下觀察，棕黃色為陽性結果。陽性強度判斷標準如下：強陽性（+ + +）指50%以上細胞陽性染色；中等強度陽性（+ +）指25%-50%細胞陽性染色；弱陽性（+）指25%以下細胞陽性染色；陰性（-）指細胞均無任何陽性染色。
2 結果 6例正常人皮膚組織中：bcl-2基因除部分基底細胞呈陽性反應外，余陰性。、Fas和bax基因為陰性表達。15例銀屑病組織中：bcl-2基因在15例表皮增生的角質形成細胞中均呈陰性表達，但14例部分基底細胞和浸潤的淋巴細胞呈陽性染色；Fas基因在12例銀屑病組織中呈陽性表達；bax基因在13例中呈陽性
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